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      Bio-techne|細胞因子從 U 到 μg 換算,看我乾坤大挪移

      在文獻中,細胞因子的檢測結果和用量常用 U/mL 或 IU/mL 表示。而 R&D Systems® 的蛋白,單位一般是 μg。U 是什么?和 IU 之間有什么差別?它們又是怎么與 μg 進行換算的呢?

      U 的定義

      首先,U 是蛋白活性單位,用于計量蛋白本身的生物學活性?;钚詥挝恢冈谧钸m條件下,單位時間內產生單位生物學效應的蛋白量。

      以酶為例,1961 年,國際生物化學學會酶學委員會提出采用統一的「國際單位」(IU)來表示酶的活力,在最適條件下,每分鐘內催化 1 微摩爾(μmol)底物轉化為產物或轉化底物中 1 微摩爾的有關基團所需的酶量。即 1 IU=1 U=1 μmol/min。

      比如大家最熟悉也是臨床最常見的谷草轉氨酶(天冬氨酸氨基轉移酶,AST),8.47 U/L=8.47 IU/L,也就是說,每升血清中,含有能在 1 分鐘內使 8.47 μmol 的氨基轉移的 AST。

      那么,IU 與 μg 又該如何換算呢?這就要引入比活性的概念。

      活性與比活性

      我們知道蛋白都有復雜的空間結構和翻譯后修飾,僅僅保證一級結構是無法確保蛋白活性的。而體現重組蛋白產品活性的重要指標,就是比活性。

      比活性是指單位質量蛋白的生物學活性單位,通常用 U/μg 或 μmol/min/μg 表示。還是以酶為例,在最適條件下,如果 1 μg 酶可以在 1 分鐘內催化 1μmol 的底物,那么其比活性就是 1U/μg(或 μmol/min/ug)。

      這是重組蛋白的一項重要指標。進行比活性項目的檢測,不僅可以反映產品生產工藝的穩定情況,而且可以比較不同表達體系、不同生產廠家生產同一產品的品質情況。比活性高說明產品的生產工藝更先進、純度更高、質量更優。

      然而蛋白的作用千變萬化,在不同的時間空間對于不同的細胞很可能會有不同的作用。如何統一呢?

      世界衛生組織聯合美國國家生物標準及控制研究所(NIBSC)給出了一系列蛋白的國際標準品,以 TNF-α為例,該標準品的比活性為 43,000 IU/mg。有了標準品,我們就能對目標蛋白進行生物學標定。

      R&D Systems® 產品活性換算

      R&D Systems® 的細胞因子產品大多經過國際標準品的標定。這樣不僅保證了細胞因子的生物學活性,更保證了其與國際標準品之間的溯源性。通過下方鏈接,便可查到 R&D Systems® 經過標定的細胞因子的比活性。

      https://www.rndsystems.com/cn/resources/technical-information/unit-conversion-table

      下表既有相關參考標準品的貨號和比活性,又有用于活性驗證的細胞系的信息。在最后一列,列出了 1 μg 蛋白與活性(U 或 IU)的換算方法。

      比如人 EGF 蛋白產品(貨號 236-EG),1 μg=1.4*103 U,如果文獻中所用的濃度為 100 U/mL,換算到該產品的質量濃度就是 100/1400=0.07 μg/mL。

       

      以上文字和圖片來源于Bio-techne

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