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      Bio-techne|重組蛋白品名中的 CF,你究竟是個啥?

      在瀏覽 Bio-Techne 網站的重組蛋白產品時,大家常常會對品名中的「CF」產生疑惑。CF 代表什么含義?品名中含/不含 CF 的蛋白有什么區別?哪種產品更適用于我的實驗?本文一一來解惑。

       

      1. CF 其名,其意 

      CF,是 Carrier Free 的意思。一般來說,為了對重組蛋白的結構及活性進行保護,我們會在蛋白產品中添加牛血清白蛋白(BSA)作為載體蛋白。但考慮到 BSA 會對某些實驗造成影響,我們又研發出不含載體蛋白(BSA)的產品,即 Carrier Free 蛋白。

      注:并不是所有不標注 CF 的蛋白產品都含有 BSA,產品的具體成分需要參考產品說明書或 COA。

       

      2. CF 蛋白與普通蛋白產品的區別

      是否添加 BSA 是 CF 蛋白產品與普通蛋白產品最大的區別。這一區別使得凍干粉重溶溶液的選擇以及重組蛋白的用途有所差異。

       

      在蛋白凍干粉重溶時,CF 蛋白產品只要使用說明書推薦的溶液溶解到規定的濃度即可,而普通蛋白產品為了保證產品不會吸附到管壁上,為蛋白產品的重溶提供一個良好的環境,在溶液中還要額外添加 0.1% 的 BSA。

      所需添加的 BSA 要求很高:不能含有蛋白酶,并且是 Fraction V 純度的 BSA。R&D Systems® 提供各類含 BSA 的蛋白重溶溶液,如:RB02(BSA / PBS)和RB04(BSA/HCl),可以根據蛋白的重溶要求自行選擇。

      在用途上,一般情況下,我們建議使用含有 BSA 的重組蛋白用于細胞或組織培養,或作為 ELISA 標準品。相對而言,當 BSA 可能會干擾實驗時,比如體內實驗、蛋白標記等,則推薦使用 CF 蛋白。另外,如果實驗平臺有特殊要求,也應根據要求選擇不含 BSA 的蛋白。

      舉例產品:Recombinant Human IL-6 (HEK293-expressed) Protein, CF(貨號 7270-IL/CF)/ Recombinant Human IL-6 (HEK293-expressed) Protein(貨號 7270-IL)

       

      3. CF 蛋白維持高活性的秘訣

      對比 CF 蛋白和普通蛋白,無論蛋白是否添加 BSA,它們的生物學活性實驗結果、運輸條件、保存條件及效期都沒有區別。既然沒有 BSA 作為蛋白載體,是什么讓 CF 蛋白保持良好的穩定性和生物學活性呢?

      舉例產品:Recombinant Human TNF-alpha (HEK293-expressed) Protein, CF

       

      答案就在說明書 Formulation 那一欄里,我們在蛋白中添加了海藻糖。海藻糖是一種以兩個葡萄糖分子通過 α,α,1,1-糖苷鍵連接的二糖。海藻糖是一種非還原糖,不與氨基酸或蛋白質發生反應。

      它本身不存在于哺乳動物體內,但哺乳動物體內卻廣泛存在分解海藻糖的酶,且海藻糖作為一種小分子的半抗原,哺乳動物對其免疫反應性很低。這使得海藻糖對活體實驗或異種移植等實驗的干擾極小。

      海藻糖不僅可以防止蛋白在脫水狀態下改變其結構,更能在高溫、低溫、高滲透壓的條件下保留蛋白的生物學活性。目前,海藻糖以其高效的蛋白保護性能與相對低廉的價格漸漸代替 BSA,成為免疫實驗產品和蛋白類產品添加劑的新寵。

       

      以上文字和圖片來源于Bio-techne

       

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